CARACTERIZACIÓN molecular de AISLAMIENTOS DE Cladosporium fulvum Cooke PROVENIENTES DE TOMATE EN CONDICIONES DE CULTIVO PROTEGIDO Translated title: MOLECULAR CHARACTERIZATION OF Cladosporium fulvum Cooke ISOLATES FROM TOMATO IN SHELTERED CROP CONDITIONS

Abstract

El moho de la hoja, causado por el hongo Cladosporium fulvum Cooke, es una enfermedad muy común y destructiva en el cultivo del tomate. Aunque existen cultivares portadores de uno o más genes de resistencia, el hecho de que el hongo muta fácilmente trae como consecuencia un uso limitado de los mismos. De ahí que, el conocimiento de las poblaciones del patógeno contribuye a los esfuerzos realizados en el programa de mejoramiento y al desarrollo de estrategias que alarguen la vida útil de los materiales obtenidos. El objetivo de este trabajo fue la caracterización molecular de 37 aislados de C. fulvum provenientes de plantas de tomate de diferentes localidades. La caracterización incluyó la identificación de los aislamientos por la amplificación de la región 28S del gen que codifica para el ARNr, la PCR con cebadores específicos dirigidos a diferentes genes relacionados con la patogenicidad (Avr2, Avr4, Avr4E, Avr9, Ecp1, Ecp2, Ecp4 y Ecp5) y los RAPDs. Todos los aislados fueron clasificados como C. fulvum. Ningún aislado amplificó para el gen Avr9, aunque se encontraron elevados porcentajes de amplificación para los genes Avr2, Avr4 y Avr4E. La virulencia de las razas 2, 4, y 2.4 está más relacionada con la presencia de la proteína Ecp2 (100%) que con la Ecp1. Todos los marcadores empleados confirmaron un elevado nivel de variabilidad molecular, aunque en ninguno de los casos hubo relación con el origen geográfico.

Translated abstract

The leaf mold caused by Cladosporium fulvum Cooke, is a very common and destructive disease in the tomato crop. Although there are cultivars with one or more resistance genes, the fact that the fungus has a very high mutation level, results in a limited use of such materials. For that reason, the knowledge of the pathogen populations contributes to the breeding program efforts to develope strategies to extent the useful life of the materials obtained. The objective of this work was the molecular characterization of the variability in a group of C. fulvum isolates from tomato plants. The molecular characterization was carried out for 37 isolates, including identification by the 28S region encoding for RNAr amplification, PCR with specific primers directed to different genes related to pathogenicity (Avr2, Avr4, Avr4E, Avr9, Ecp1, Ecp2, Ecp4 y Ecp5) and RAPDs. All the isolates were classified as C. fulvum. Any of them amplified for the Avr9 gene, although there were high amplification percentages for the Avr2, Avr4 and Avr4E genes. The virulence of the races 2, 4, and 2.4 were more related to the presence of the Ecp2 protein (100%) than to Ecp1. All the markers used confirmed a high level of molecular variability, although no relation the geographical origin was found.